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Location:ホーム実験手法別製品・技術情報ウェスタンブロッティング

ウェスタンブロッティング 攻略ガイド
ECL 実験ノート/トラブルシューティング 2014改訂版

無料

攻略ガイド表紙

  • 思うような実験結果が出ない
  • はじめてでも結果を確実に出したい
  • 学生の実験指導に使えるガイドがほしい

という皆さまに、おすすめしたいウェスタンブロッティングについて解説したガイドブックです。
サンプル調製から検出までを詳しく解説、またトラブルシューティングも豊富に掲載。実験の際にぜひお手元においていただきたい1 冊です。

※お1人様につき1冊進呈いたします。
※代理店様によるお申込みはご遠慮ください。

→ ウェスタンブロッティング攻略ガイド チラ見せ(PDF)

攻略ガイドポイント

目次

  • 実験目的にあった検出試薬の選択に ⇒ウェスタンブロッティングで目的の結果を得るには
  • よくあるお問合せ例とその検討方法を知るには ⇒今のウェスタンブロッティングの結果に満足していますか?
  • ECL シリーズ検出試薬の反応系を知る ⇒化学発光、直接蛍光
  • 各検出試薬の仕様を調べたい方に ⇒ECL シリーズ検出試薬
  • ウェスタンブロッティング攻略ガイドの構成とマークの説明

実践編

  • 実験に必要な装置・試薬
  • ブロッキング~抗体反応で使用する洗浄バッファーの作り方
  • ECL Prime ウェスタンブロッティング検出プロトコール
  • ECL ウェスタンブロッティング検出プロトコール
  • ECL Select ウェスタンブロッティング検出プロトコール
  • ECL Plex ウェスタンブロッティング検出プロトコール
  • 時間短縮のためのヒント
  • 検出試薬変更時のアドバイス

トラブルシューティング

  • トラブル例
  • トラブルシューティング
    • バンドが検出できない
      • シグナルが検出できない
      • 全体的に黒くて(バックグラウンドが高くて)バンドが検出されない
      • バンドはあるが一部検出されない
    • バンドは検出できるが結果に不満がある
      • シグナルが弱い
      • シグナルが強すぎる
      • シグナルが白く抜けている
      • 非特異のバンドが検出される
    • バンド以外に問題がある
      • 不規則でまだらなシミが検出される
      • バックグラウンドが高い
      • そのほかの汚れや非特異的な検出
  • トラブルシューティング参考例
  • ブルーライトテスト

基礎編

  • ウェスタンブロッティングの流れと使用製品例
  • 1. サンプル調製
    • サンプル調製概要
    • タンパク質抽出方法
    • サンプルの保護
    • 阻害物質の除去
      • タンパク質以外の阻害物質の除去
      • 血清や血漿サンプルからの含有量の多いタンパク質の除去
      • 脱塩、バッファー交換およびサンプル濃縮
    • タンパク質の定量
      • タンパク質定量のための製品
  • 2.電気泳動
    • 電気泳動装置
    • ゲル・バッファー
      • 電気泳動装置の選び方
    • タンパク質分子量マーカー
      • タンパク質分子量マーカーの選び方
      • ECL Plex Fluorescent Rainbow Markers の使い方
      • ECL DualVue Western Blotting Markers の使い方
      • Rainbow Molecular Weight Markers の使い方
    • SE 260 での電気泳動方法
    • ゲル染色試薬
      • ゲル染色試薬の選び方
      • CBB 染色
      • Silver Staining Kit, Protein を用いた銀染色
  • ブロッティング
    • ブロッティング装置
      • ブロッティング装置の選び方
    • メンブレン
      • メンブレンの選び方
      • PVDF メンブレンの親水化処理
    • ブロッティングバッファー
      • ブロッティングバッファーの調製方法
    • TE70 / TE77 PWR Semi-Dry Transfer Unit でのブロッティング方法
    • ブロッティングの確認
      • 有色マーカーを使用する
      • ブロッティングした後のメンブレンをCBB で染色する
  • 抗体反応
    • ブロッキング剤
      • ブロッキング剤の選び方
      • ブロッキング剤の使い方
    • 二次抗体
      • 二次抗体の選び方
      • ECL 検出試薬の選び方
    • 抗体濃度
      • 抗体濃度の至適化
    • 1 枚のメンブレンで複数の目的タンパク質を検出する
  • 検出&解析
    • 検出
      • 検出方法の選び方
      • 種類と特徴
      • 各ECL 検出試薬に適した検出方法
      • 検出後のデータの評価
    • X 線フィルム
      • X 線フィルムによる化学発光検出方法
    • CCD イメージャー
      • Amersham Imager 600 シリーズによる化学発光検出
    • 蛍光イメージャー
      • Typhoon FLA 9500 による化学蛍光・蛍光検出
    • 検出したタンパク質の定量
    • ソフトウェアを用いた定量方法
    • 参考文献リスト
  • ECL ユーザーの皆さまより
    • FAQ(製品Q&A)コーナーのご紹介
    • データ紹介~ライフサイエンスフォーラムより~
    • ご注文情報
    • 試薬・消耗品サンプルのご案内
    • Life Sciences Academy *のご紹介
    • ウェスタンブロッティング関連製品マップ

* Life Sciences Academy は、ゼネラル・エレクトリック・カンパニイまたはその関連会社の商標です。

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